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鸡病防治

鸡副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌混合感染的的实验室诊断方法

发布时间:2017-10-31 13:18:04   来源:   标签:
内容提要: 鸡副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌混合感染的的实验室诊断方法1.涂片镜检无菌操作,采取6羽病死鸡的心脏、肝脏、关节液和盲肠内容物作触片或涂片,革兰染色、镜检发现:(1)于关节液和心脏内:纯一的革兰阳性球菌,菌体单个、成双或串状排列。(2)于肝脏和盲肠内..

鸡副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌混合感染的的实验室诊断方法

1.涂片镜检无菌操作,采取6羽病死鸡的心脏、肝脏、关节液和盲肠内容物作触片或涂片,革兰染色、镜检发现:
(1)于关节液和心脏内:纯一的革兰阳性球菌,菌体单个、成双或串状排列。

(2)于肝脏和盲肠内容物内:除上述细菌外,还发现革兰阴性短杆菌,无芽孢。

2.分离培养无菌操作,将上述病死鸡的病料分别接种于以下多种培养基,37℃培养24小时。结果均发现细菌生长。
(1)在普通琼脂平板上:长出乳白色、边缘整齐、湿润、隆起的菌落。
(2)在S(沙门菌)S(志贺菌)琼脂平板上:长成粉红色、湿润、半透明和乳白色的小菌落,有的中央有黑色。
(3)在伊红美蓝和麦康凯琼脂平板上:长成中、小粉红色的菌落。
(4)在高盐培养基上:长成乳白色菌落,由于产酸使培养基变黄。
(5)在血液琼脂平板上:长成针尖状、乳白色、半透明、湿润的菌落,并产生溶血环。
(6)普通肉汤:上述分离菌株接种于普通肉汤,37℃培养24小时,发现均匀混浊、呈白色粉末状沉淀。上述培养物经革兰染色、镜检,发现细菌形态与上述病料中分离菌株均为一致。

3.生化反应无菌操作,采取上述两种分离菌株,分别接种于三 糖铁培养基和14种微量糖发酵管及其他生化管。结果如下:
(1)球菌:三糖铁培养基底层产酸、微产气,斜面产酸,不产生硫化氢(H2S);能发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木糖、鼠李糖、甘露醇和卫茅醇,不发酵蔗糖;产生靛基质(吲哚),甲基红试验阳性,VP试验阴性;能产生过氧化氢酶和血浆凝固酶;高盐培养基上能生长。根据上述生化反应的结果,将分离的球菌鉴定为金黄色葡萄球菌。

(2)杆菌:三糖铁培养基底层产酸、产气,斜面产酸,能产生硫化氢;能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、木糖、阿拉伯胶糖和甘露醇,不发酵乳糖、鼠李糖和棉子糖;分解尿素,液化明胶,还原硝酸盐,产生靛基质(吲哚);甲基红试验阳性,VP试验阴性;氰化钾(KCN)抑制生长;能产生过氧化氢酶,但不产生血浆凝固酶。根据上述生化反应的结果,将分离的杆菌鉴定为副伤寒沙门菌。

4.动物———雏鸡试验选取健康雏鸡12羽,每组3羽,共4组,分别接种所分离的两株菌株的肉汤培养物:第一组接种球菌(2羽为 0.5毫升,1羽为0.2毫升,腹腔,下同);第二组接种杆菌;第三组接种杆菌、球菌;第四组为对照组,接种灭菌生理盐水。

结果如下:第二、三组于接种后4小时,雏鸡精神不振,缩颈呆立,闭目,拉稀;第二组试验雏鸡在24~48小时内死亡;第三组于16小时内死亡。第一组除见精神不振外,无其他症状,第四组对照雏鸡均健活。剖检所有死雏,见胸腔和心包积液,肝脏有不同程度的坏死,肠道和肠系膜充血,肠臌气,内充满白色、油状液体,黏膜脱落。经细菌分离有相应的接种菌株。
5.血清学检验无菌操作,采取18羽病鸡血清和羽髓进行马立克病和病毒性关节炎的琼脂扩散试验,结果全为阴性反应。另用上述18羽病鸡的全血进行鸡支原体病平板凝集试验,结果亦全为阴性反应。根据上述结果,能排除上述三种传染病。

 

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