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鸡病防治

鸡马立克氏病的血清学诊断方法

发布时间:2017-12-04 09:14:23   来源:   标签:鸡马立克氏病的血清学诊断
内容提要: 一、MD诊断依据MD是高度接触传染性的,在商业鸡群中几乎是无所不在,但在感染鸡中仅有一小部分发生MD,此外,接种疫苗的鸡虽然能得到保护不发生MD,但仍能感染MD强毒,因此是否感染MDV不能作为诊断MD的标准。主要依据临诊症状和病理变化。血清学和病毒学方法可用于鸡..

 

一、MD诊断依据
MD是高度接触传染性的,在商业鸡群中几乎是无所不在,但在感染鸡中仅有一小部分发生MD,此外,接种疫苗的鸡虽然能得到保护不发生MD,但仍能感染MD强毒,因此是否感染MDV不能作为诊断MD的标准。
主要依据临诊症状和病理变化。血清学和病毒学方法可用于鸡群感染情况的监测,但不能作为发生MD的诊断依据。

二、鸡群MDV感染情况的监测
一般采用琼脂扩散的血清学方法,检测鸡血清中的MD特异抗体或鸡羽髓中的MD抗原。

目的:
1 熟悉鸡马立克氏病的诊断方法

原理:
可溶性抗原与相应抗体结合(在半固体琼脂中)后,在适量电解质存在下,经过一定时间形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。

材料与试剂 
8%NaCl琼脂平板、打孔器、针头、加样枪、枪头、生理盐水
马立克标准阳性血清、马立克标准琼扩抗原、待检羽髓

操作方法
(1) 打孔:用打孔器对琼脂平板打孔,中央打1个孔,周围再打6个孔(孔径4mm,孔距3mm),形成梅花形图案。 
(2)用针头挑出孔内琼脂,注意不要挑破孔缘。
(3)封底:在火焰上缓缓加热,微微烫即可。使孔底边缘的琼脂少许熔化以封底,以免加样后液体从孔底渗漏。
(4)加样:在中央孔加MD阳性血清,向周边1、4孔加标准MD琼扩抗原,2、3、4 5孔加待检羽髓浸液(加数滴生理盐水在EP管内挤压,浸泡)。6孔加生理盐水每孔约加50μl,以加满为度。 
(5)加完后,盖上平皿盖,置湿盘中,在37℃下自由扩散24小时。 

结果判定
被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线,并与周边已知抗原的沉淀线互相融合者,判为阳性;不出现沉淀线的判为阴性。

注意事项
1) 在平皿上贴好标签,防止弄混。
2) 挑琼脂时注意不要挑破琼脂边缘。
3) 一定要封底。 
4) 加样时,注意不要产生气泡,以加满为度,否则影响反应结果。 
5) 每加完不同的样后要更换枪头,以免造成污染

 

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